Hozirda brauzeringizda Javascript o'chirilgan. Ushbu veb-saytning ba'zi funksiyalari JavaScript o'chirilgan holda ishlamaydi.
O'zingizning aniq ma'lumotlaringiz va qiziqishingizdagi aniq dori vositasi bilan ro'yxatdan o'ting, biz siz taqdim etgan ma'lumotlarni keng ma'lumotlar bazamizdagi maqolalar bilan moslashtiramiz va darhol PDF nusxasini sizga elektron pochta orqali yuboramiz.
Ban-Lan-Gen granulalari sichqonlarda dekstran natriy sulfat keltirib chiqaradigan surunkali relapsing kolitni ichak mikrobiotasini modulyatsiya qilish va ichakdagi SCFA Derived-GLP-1 ishlab chiqarishni tiklash orqali susaytiradi.
Jiao Peng,1-3,*Li Xi,4,*Zheng Lin,3,5 Duan Lifang,1 Gao Zhengxian,2,5 Diehu,1 Li Jie,6 Li Xiaofeng,6 Shen Xiangchun,5 Xiao Haitao21Peking universiteti Shenzhen kasalxonasi farmatsiya bo'limi, Shenzhen, Xitoy Xalq Respublikasi; 2Shenzhen universiteti sog'liqni saqlash fanlari markazi farmatsiya maktabi, Shenzhen, Xitoy Xalq Respublikasi; 3Guizhou tibbiyot universiteti muhandislik texnologiyalari tadqiqot markazi Etnik tibbiyot va an'anaviy xitoy tibbiyotini rivojlantirish va qo'llash Ta'lim vazirligi, Guizhou provinsiyasi farmatsiya kalit laboratoriyasi, Guizhou tibbiyot universiteti, Guizhou, Xitoy Xalq Respublikasi; 4 Gastroenterologiya bo'limi, Pekin universiteti Shenzhen kasalxonasi, Shenzhen, Xitoy Xalq Respublikasi; 5Guizhou tibbiyot universiteti farmatsiya maktabi, Dorivor o'simliklarning funksiyasi va qo'llanilishi davlat kalit laboratoriyasi, Guizhou; 6 Laboratoriya tibbiyoti bo'limi, Pekin universiteti Shenzhen kasalxonasi, Shenzhen, Xitoy [email protected] Shen Xiangchun, Farmatsiya maktabi, Guizhou tibbiyot universiteti, Guizhou, Xitoy Xalq Respublikasi, 550004, Elektron pochta [email protected] Maqsad: GLP-1 asosidagi terapiya yallig'lanishli ichak kasalliklarini davolashning yangi usuli hisoblanadi. Ban-Lan-Gen (BLG) granulalari turli xil yallig'lanish holatlarini davolashda potentsial yallig'lanishga qarshi faollikni namoyish etuvchi ma'lum antiviral TCM formulasidir. Biroq, uning kolitga qarshi yallig'lanishga qarshi ta'siri va ta'sir mexanizmi hali ham noma'lum. USULLAR: Sichqonlarda dekstran natriy sulfat (DSS) tomonidan qo'zg'atilgan surunkali qaytalanuvchi kolitni aniqlash. BLG ning himoya ta'sirini baholash uchun kasallik faolligi indekslari, shikastlanishning gistologik markerlari va yallig'lanishga qarshi sitokin darajalari o'tkazildi. BLG ning ichak mikrobiotasi va ichakka ta'siri sarum GLP-1 darajalari va yo'g'on ichak Gcg, GPR41 va GRP43 ifodasi, ichak mikrobiotasi tarkibi, najasli SCFA darajalari va birlamchi sichqondan GLP-1 ning ajralib chiqishi bilan tavsiflandi. Yo'g'on ichak epiteliy hujayralari SCFA dan olingan GLP-1 ishlab chiqarish. Natijalar: BLG bilan davolash tana vaznining yo'qolishini, DAI ni, yo'g'on ichakning qisqarishini, yo'g'on ichak to'qimalarining shikastlanishini va yo'g'on ichak to'qimasida TNF-α, IL-1β va IL-6 ning yallig'lanishga qarshi sitokin darajasini sezilarli darajada kamaytirdi. Bundan tashqari, BLG bilan davolash kolit sichqonlarida yo'g'on ichak Gcg, GPR41 va GRP43 ekspressiyasini va sarum GLP-1 darajasini sezilarli darajada tiklashi mumkin, shuningdek, Akkermansia va Prevotellaceae_UCG-001 kabi SCFA ishlab chiqaruvchi bakteriyalarni ko'paytirish va Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas va Oscillibacter kabi bakteriyalarning ko'pligini kamaytirish orqali. Bundan tashqari, BLG bilan davolash kolit sichqonlarining najasidagi SCFA darajasini sezilarli darajada oshirishi mumkin. Shu bilan birga, in vitro tajribalar shuni ko'rsatdiki, BLG bilan davolash qilingan sichqonlarning najas ekstrakti GLP-1 ni ajratadigan birlamchi kichik sichqoncha yo'g'on ichak epiteliy hujayralarini sezilarli darajada rag'batlantirishi mumkin. Xulosa: Ushbu topilmalar BLG ning kolitga qarshi ta'sirga ega ekanligini ko'rsatadi. BLG terapiya sifatida ishlab chiqilishi mumkin, hech bo'lmaganda qisman ichak mikrobiotasini modulyatsiya qilish va ichakning SCFA dan olingan GLP-1 ishlab chiqarishini tiklash orqali. Surunkali qaytalanuvchi kolit uchun istiqbolli dorilar. Kalit so'zlar: kolit, Ban-Lan-Gen granulalari, ichak mikrobiotasi, qisqa zanjirli yog 'kislotalari, GLP-1.
Yarali kolit (YK) - bu yo'g'on ichak va to'g'ri ichakning uzoq muddatli yallig'lanish kasalligi bo'lib, u takroriy diareya, qorin og'rig'i, vazn yo'qotish va shilliq-yiringli qonli najas bilan tavsiflanadi.1 So'nggi paytlarda G'arb turmush tarzining tobora ommalashib borishi bilan Xitoy kabi ilgari kam uchraydigan mamlakatlarda YK tarqalishi ortib bormoqda.2 Bu o'sish jamoat salomatligi uchun katta muammolarni keltirib chiqaradi va bemorlarning ishlash qobiliyati va hayot sifatiga jiddiy ta'sir ko'rsatadi. Shunisi e'tiborga loyiqki, YK patogenezi asosan noma'lumligicha qolmoqda, ammo genetika, atrof-muhit omillari, ichak mikrobiotasi va immun tizimi YK rivojlanishiga hissa qo'shishi odatda qabul qilinadi.3 Hozir ham YK uchun davo yo'q va davolashning maqsadi klinik jihatdan klinik alomatlarni nazorat qilish, remissiyani qo'zg'atish va saqlab turish, shilliq qavatning bitishini rag'batlantirish va qaytalanishni kamaytirishdir. Klassik davolash usullariga aminosalitsilatlar, kortikosteroidlar, immunosupressantlar va biologik preparatlar kiradi. Biroq, bu dorilar turli xil yon ta'sirlari tufayli kerakli ta'sirga erisha olmaydi.4 So'nggi paytlarda ko'plab amaliy tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, an'anaviy xitoy tibbiyoti (TCM) katta salohiyatga ega. kam toksiklik bilan UC ni yengillashtirishga yordam beradi, bu esa yangi an'anaviy xitoycha davolash usullarini ishlab chiqish UC.5-7 uchun istiqbolli davolash strategiyasi ekanligini ko'rsatadi.
Banlangen granulalari (BLG) - bu Banlangen ildizining suv ekstraktidan tayyorlangan an'anaviy xitoy tibbiyot preparati.8 Virusga qarshi samaradorligidan tashqari, BLG turli xil yallig'lanish holatlarini davolashda potentsial yallig'lanishga qarshi faollikni namoyish etadi.9,10 Bundan tashqari, glyukozinolatlar (R, S-gotrin, progotrin, epiprorubin va glyukozid Radix isatidisning suvli ekstraktlaridan ajratib olingan va aniqlangan) va nukleozidlar (gipoksantin, adenozin, uridin va guanozin) hamda indigo va indirubin kabi indigo alkaloidlari.11,12 Avvalgi tadqiqotlar adenozin, uridin va indirubin birikmalari kolitning turli hayvon modellarida kuchli antikolit ta'sirini ko'rsatishini yaxshi hujjatlashtirgan.13-17 Biroq, BLG ning kolitdagi samaradorligini baholash uchun dalillarga asoslangan tadqiqotlar o'tkazilmagan. Ushbu tadqiqotda biz C57BL/6 sichqonlarida dekstran natriy sulfat (DSS) tomonidan qo'zg'atilgan surunkali qaytalanuvchi kolitga BLG ning himoya ta'sirini o'rganib chiqdik va ... ni topdik. BLG ni og'iz orqali qabul qilish sichqonlarda DSS keltirib chiqaradigan surunkali qaytalanuvchi yo'g'on ichak yallig'lanishini sezilarli darajada kamaytirganligi sababli, uning tartibga solish mexanizmlari ichak mikrobiotasini modulyatsiya qilish va ichakdan olingan glyukagonga o'xshash peptid-1 (GLP-1) ishlab chiqarishni tiklash bilan bog'liq.
BLG granulalari (shakarsiz, NMPA tomonidan tasdiqlangan Z11020357; Beijing Tongrentang Technology Development Co., Ltd., Pekin, Xitoy; partiya raqami: 20110966) dorixonalardan sotib olindi. DSS (Molekulyar Og'irligi: 36,000–50,000 Dalton) MP Biologicals (Santa Ana, AQSh) dan sotib olindi. Sulfasalazin (SASP) (≥ 98% tozalik), gematoksilin va eozin Sigma-Aldrich (Sent-Luis, MO, AQSh) dan sotib olindi. Sichqoncha TNF-α, IL-1β va IL-6 luminex Elisa tahlil to'plamlari R&D tizimlaridan (Minneapolis, MN, AQSh) sotib olindi. Sirka kislotasi, propion kislotasi va yog' kislotasi Aladdin Industries (Shanxay, Xitoy) dan sotib olindi. 2-Etilbutirik kislota Merck KGaA (Darmshtadt, Germaniya) dan sotib olindi.
6-8 haftalik erkak C57BL/6 sichqonlari (tana vazni 18-22 g) Beijing Wetahe Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (Pekin, Xitoy) dan sotib olindi va 12 soatlik yorug'lik/qorong'ulik sikli bilan 22 ± 2 °C haroratda saqlandi. Sichqonlarga yangi muhitga moslashish uchun bir hafta davomida ichimlik suvidan erkin foydalanish imkoniyati bilan standart kemiruvchilar parhezi berildi. Keyin sichqonlar tasodifiy ravishda to'rt guruhga bo'lindi: nazorat guruhi, DSS model guruhi, SASP bilan davolangan guruh (200 mg/kg, og'iz orqali) va BLG bilan davolangan guruh (1 g/kg, og'iz orqali). 1A-rasmda ko'rsatilganidek, avvalgi tadqiqotimizga ko'ra, avvalgi tadqiqotimizga ko'ra, eksperimental surunkali qaytalanuvchi kolit sichqonlarda 5 kun davomida 1,8% DSS ning uch sikli, so'ngra 7 kun davomida distillangan suv bilan qo'zg'atildi. SASP va BLG bilan davolangan guruhlardagi 18 sichqon 0-kundan boshlab har kuni mos ravishda SASP va BLG bilan davolandi. Dastlabki tajribalarga ko'ra, BLG dozasi 1 g/kg ga o'rnatildi. Shu bilan birga, adabiyotlarga muvofiq SASP dozasi 200 mg/kg ga o'rnatildi.4 Nazorat va DSS model guruhlari tajriba davomida bir xil hajmdagi suv oldilar.
1-rasm. BLG sichqonlarda DSS keltirib chiqaradigan surunkali qaytalanuvchi kolitni yaxshilaydi.(A) Surunkali qaytalanuvchi kolitning eksperimental dizayni va davolash, (B) tana vaznining o'zgarishi, (C) kasallik faolligi indeksi (DAI) ball, (D) yo'g'on ichak uzunligi, (E) yo'g'on ichakning vakillik tasviri, (F) H&E bo'yash yo'g'on ichak (kattalashtirish, ×100) va (G) gistologik ball. Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM (n = 6) sifatida taqdim etilgan.##p < 0.01 yoki ###p < 0.001 va nazorat (Con) guruhi; *p < 0.05 yoki **p < 0.01 yoki ***p < 0.001 va DSS guruhi.
Tana vazni, najas konsistensiyasi va rektal qon ketishi har kuni qayd etildi. Kasallik faolligi indeksi (DAI) avval tasvirlanganidek, tana vazni, najas konsistensiyasi va rektal qon ketishi ballarini birlashtirish orqali aniqlandi.19 Tajriba oxirida barcha sichqonlar evtanaziya qilindi va keyingi tajribalar uchun qon, najas va yo'g'on ichak yig'ildi.
Yo'g'on ichak to'qimasi formalin bilan fiksatsiya qilindi va kerosinga joylashtirildi. 5 mikronli kesmalar tayyorlandi va gematoksilin-eozin (H&E) bilan bo'yaldi, so'ngra avval tasvirlanganidek ko'r qilindi va ballga qo'yildi.19
Yo'g'on ichak to'qimasining umumiy RNKsi Trizol reagenti (Invitrogen, Carlsbad, CA) yordamida ajratib olindi, so'ngra teskari transkriptaza (TaKaRa, Kusatsu, Shiga, Yaponiya) yordamida kDNK ekstraksiya qilindi. Miqdoriy PZR SYBR Green Master (Roche, Bazel, Shveytsariya) yordamida real vaqt rejimida PZR tizimi yordamida amalga oshirildi. Maqsadli gen transkriptlari β-aktinga normallashtirildi va ma'lumotlar 2-ΔΔCT usuli yordamida tahlil qilindi. Gen primerlari ketma-ketligi 1-jadvalda ko'rsatilgan.
Sichqoncha yo'g'on ichakning birlamchi epitelial hujayralarini ajratish va kultivatsiya qilish avval tasvirlanganidek amalga oshirildi.20 Qisqacha aytganda, 6-8 haftalik sichqonlarning yo'g'on ichaklari avval bachadon bo'yni chiqishi bilan so'yilgandan so'ng kesildi, keyin uzunlamasına ochildi, Hanks Balanced Salt Solution (HBSS, kaltsiy va magniysiz) bilan ishlov berildi va 0,5-1 mm kichik bo'laklarga kesildi. Keyinchalik, to'qimalar erkin DMEM muhitida 0,4 mg/ml kollagenaza XI (Sigma, Poole, Buyuk Britaniya) bilan hazm qilindi va xona haroratida 5 daqiqa davomida 300 xg da santrifuga qilindi. Pelletni DMEM muhitida (10% homila sigir zardobi, 100 birlik/ml penitsillin va 100 µg/ml streptomitsin bilan to'ldirilgan) 37 °C da qayta eritib, neylon to'rdan o'tkazildi (g'ovak hajmi ~250 µm). Yo'g'on ichak epitelial hujayralarining alikvotlari shisha taglikli idishlarga joylashtirildi va sirka kislotasi, propion kislotasi, yog' kislotasi va sichqon najasi bilan inkubatsiya qilindi. ekstraktlar 37°C da 2 soat davomida, 5% CO2 da.
Yo'g'on ichak to'qimasi PBS bilan gomogenlashtirildi va yo'g'on ichak to'qimasidagi IL-6, TNF-α va IL-1β sitokinlari darajasi luminex ELISA tahlil to'plamlari (R&D tizimlari, Minneapolis, MN, AQSh) yordamida aniqlandi. Xuddi shunday, ishlab chiqaruvchining ko'rsatmalariga muvofiq birlamchi sichqoncha yo'g'on ichak epiteliy hujayralarining sarum va madaniyat muhitidagi GLP-1 darajasi ELISA to'plami (Bioswamp, Wuhan, Xitoy) yordamida aniqlandi.
Najasdan olingan umumiy DNK DNK ekstraksiya to'plami (Tiangen, Xitoy) yordamida ajratib olindi. DNKning sifati va miqdori mos ravishda 260 nm/280 nm va 260 nm/230 nm nisbatlarida o'lchandi. Keyinchalik, har bir ajratib olingan DNKdan shablon sifatida foydalanib, turli mintaqalarda 16S rRNA genining V3-V4 mintaqalarini kuchaytirish uchun maxsus 338F (ACTCCTACGGGAGGCAGCAG) va 806R (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) primerlari ishlatilgan. PCR mahsulotlari QIAquick Gel Extraction Kit (QIAGEN, Germaniya) yordamida tozalangan, real vaqt rejimida PCR yordamida aniqlangan va IlluminaMiseq PE300 sekvenlash platformasi (Illumina Inc., CA, AQSh) yordamida sekvenlangan. Bioinformatika tahlili uchun ma'lumotlarni qayta ishlash avval xabar qilingan protokollarga muvofiq amalga oshirildi.21,22 Qisqasi, xom ekspres fayllarni filtrlash uchun Cutadapt (V1.9.1) dan foydalaning. OTUlar... UPARSE (7.0.1001 versiyasi) yordamida klasterlangan, o'xshashlik chegarasi 97% ni tashkil etdi va ximerik ketma-ketliklarni olib tashlash uchun UCHIME ishlatilgan. Jamiyat tarkibini tahlil qilish va tasniflash SILVA ribosomal RNK gen ma'lumotlar bazasiga asoslangan RDP klassifikatori (http://rdp.cme.msu.edu/) yordamida amalga oshirildi.
Qisqa zanjirli yog 'kislotalari (sirka kislotasi, propion kislotasi va butir kislotasi) darajasi Tao va boshqalar tomonidan ilgari tasvirlanganidek, ba'zi o'zgartirishlar bilan o'lchandi.23 Qisqacha aytganda, 100 mg najas avval 0,4 ml deionizatsiyalangan suvda suspenziya qilindi, so'ngra 0,1 ml 50% sulfat kislota va 0,5 ml 2-etilbutir kislotasi (ichki standart) qo'shildi, so'ngra gomogenlashtirildi va 4°C da qizdirildi. C da 15 daqiqa davomida 12000 rpm tezlikda santrifuga qilindi. Supernatant 0,5 ml efir bilan ekstraksiya qilindi va tahlil qilish uchun GC ga yuborildi. Gaz xromatografiyasi (GX) tahlili uchun namunalar olov ionizatsiyasi detektori (FID) bilan jihozlangan GC-2010 Plus gaz xromatografiyasi (Shimadzu, Inc.) yordamida tahlil qilindi. Ajratish ZKAT-624 ustuni, 30 m × 0,53 mm × 0,3 mkm (Lanzhou Zhongke Antai Analytical Technology Co., Ltd., Xitoy) yordamida amalga oshirildi. Ma'lumotlar GX eritma dasturi (Shimadzu, Inc.) yordamida olindi. Bo'linish nisbati 10:1, tashuvchi gaz azot va oqim tezligi 6 ml/min edi. In'ektsiya hajmi 1 mkL edi. Injektor va detektor harorati 300°C edi. Pech harorati 140°C da 13,5 daqiqa davomida ushlab turildi, keyin 250°C ga ko'tarildi. daqiqasiga 120°C tezlikda; harorat 5 daqiqa davomida ushlab turildi.
Ma'lumotlar o'rtacha qiymat ± o'rtacha qiymatning standart xatosi (SEM) sifatida taqdim etilgan. Ma'lumotlarning ahamiyati bir tomonlama ANOVA va undan keyin Duncanning ko'p diapazonli testi yordamida baholandi. Barcha hisob-kitoblar uchun GraphPad Prism 5.0 dasturi (GraphPad Software Inc., San-Diego, CA, AQSh) ishlatilgan va p < 0.05 statistik jihatdan ahamiyatli deb hisoblangan.
Ma'lumki, UC kuchli qorin og'rig'i, diareya va qon ketishi bilan kechadigan surunkali qaytalanuvchi kolit kasalligidir. Shuning uchun, BLG ning kolitga qarshi samaradorligini baholash uchun sichqonlarda DSS keltirib chiqaradigan surunkali qaytalanuvchi kolit aniqlandi (1A-rasm). Nazorat guruhi bilan taqqoslaganda, DSS model guruhidagi sichqonlarda tana vazni sezilarli darajada kamaydi va DAI yuqori bo'ldi va bu o'zgarishlar 24 kunlik BLG davolashdan keyin sezilarli darajada tiklandi (1B va C-rasm). Yo'g'on ichakning qisqarishi UC ning muhim belgisidir. 1D va E-rasmlarda ko'rsatilgandek, DSS olgan sichqonlarning yo'g'on ichak uzunligi sezilarli darajada qisqardi, ammo BLG davolash orqali yengillashdi. Keyinchalik, yo'g'on ichak yallig'lanishini baholash uchun gistopatologik tahlil o'tkazildi. H&E bo'yalgan tasvirlar va patologik ballar shuni ko'rsatdiki, DSS yuborish yo'g'on ichak arxitekturasini sezilarli darajada buzdi va kriptlarning yo'q qilinishiga olib keldi, BLG bilan davolash esa kriptlarning yo'q qilinishini va patologik ballarni sezilarli darajada kamaytirdi (1F va G-rasm). Shunisi e'tiborga loyiqki, 1 g/kg dozada BLG ning himoya ta'siri SASP dozasida 200 mg/kg. Umumiy holda, bu topilmalar BLG sichqonlarda DSS keltirib chiqaradigan surunkali qaytalanuvchi kolitning og'irligini kamaytirishda samarali ekanligini ko'rsatadi.
TNF-α, IL-1β va IL-6 yo'g'on ichak yallig'lanishining muhim yallig'lanish belgilari hisoblanadi. 2A-rasmda ko'rsatilgandek, DSS nazorat guruhiga nisbatan yo'g'on ichakda TNF-α, IL-1β va IL-6 genlarining ifodalanishini sezilarli darajada oshirdi. BLG ni qo'llash bu DSS vositachiligidagi o'zgarishlarni sezilarli darajada o'zgartirishi mumkin. Keyin, biz yo'g'on ichak to'qimasida yallig'lanish sitokinlari TNF-α, IL-1β va IL-6 darajasini aniqlash uchun ELISA dan foydalandik. Natijalar shuningdek, DSS bilan davolangan sichqonlarda TNF-α, IL-1β va IL-6 ning yo'g'on ichak darajasi sezilarli darajada oshganligini, BLG bilan davolash esa bu o'sishlarni yumshatganligini ko'rsatdi (2B-rasm).
2-rasm. BLG DSS bilan davolangan sichqonlarning yo'g'on ichakida gen ekspressiyasini va yallig'lanishga qarshi sitokinlar TNF-α, IL-1β va IL-6 ishlab chiqarilishini inhibe qiladi.(A) TNF-α, IL-1β va IL-6 ning yo'g'on ichak gen ekspressiyasi; (B) TNF-α, IL-1β va IL-6 ning yo'g'on ichak oqsili darajasi. Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM (n = 4–6) sifatida taqdim etilgan.#p < 0.05 yoki ##p < 0.01 yoki ###p < 0.001 va nazorat (Con) guruhi; *p < 0.05 yoki **p < 0.01 va DSS guruhi.
Ichak disbiozi UC patogenezida juda muhim ahamiyatga ega.24 DSS bilan davolangan sichqonlarning ichak mikrobiotasini BLG modulyatsiya qiladimi yoki yo'qligini tekshirish uchun ichak tarkibidagi bakteriyalar jamoasini tahlil qilish uchun 16S rRNK ketma-ketligi o'tkazildi. Venn diagrammasi shuni ko'rsatadiki, uchta guruh 385 ta OTUga ega. Shu bilan birga, har bir guruh noyob OTUga ega edi (3A-rasm). Bundan tashqari, 3B va C-rasmlarda ko'rsatilgan Chao1 indeksi va Shannon indeksi BLG bilan davolangan sichqonlarda ichak mikrobiotasining jamoaviy xilma-xilligi kamayganligini ko'rsatdi, chunki Shannon indeksi BLG bilan davolangan guruhda sezilarli darajada kamaydi. Uch guruh o'rtasida klasterlash naqshlarini aniqlash uchun asosiy komponent tahlili (PCA) va asosiy koordinata tahlili (PCoA) qo'llanildi va DSS bilan davolangan sichqonlarning jamoaviy tuzilishi BLG bilan davolangandan keyin aniq ajratilganligini ko'rsatdi (3D va E-rasm). Bu ma'lumotlar BLG bilan davolash DSS bilan qo'zg'atilgan kolitli sichqonlarning jamoaviy tuzilishiga sezilarli darajada ta'sir ko'rsatganligini ko'rsatadi.
3-rasm. BLG DSS keltirib chiqaradigan kolitli sichqonlarda ichak mikrobiotasining xilma-xilligini o'zgartiradi.(A) OTU ning Venn diagrammasi, (B) Chao1 indeksi, (C) Shannonning boylik indeksi, (D) OTU ning asosiy komponent tahlili (PCA) ballari grafigi, (E) OTU asosiy koordinata tahlili (PCoA) ballari. Rasm. Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM (n = 6) sifatida keltirilgan.**p < 0.01 va DSS guruhi.
Najas mikrobiotasidagi o'ziga xos o'zgarishlarni baholash uchun biz ichak mikrobiotasining tarkibini barcha taksonomik darajalarda tahlil qildik. 4A-rasmda ko'rsatilganidek, barcha guruhlardagi asosiy fila Firmicutes va Bacteroidetes, undan keyin Verrucomicrobia edi. DSS bilan davolangan sichqonlarning najas mikrobial jamoalarida Firmicutes va Firmicutes/Bacteroidetes nisbatlarining nisbiy miqdori nazorat sichqonlariga nisbatan sezilarli darajada oshdi va bu o'zgarishlar BLG bilan davolashdan keyin sezilarli darajada teskari bo'ldi. Xususan, BLG bilan davolash DSS bilan qo'zg'atilgan kolitli sichqonlarning najasida Verrucobacteriumning nisbiy miqdorini sezilarli darajada oshirdi. Uy sharoitida najas mikrobial jamoalarini Lachnospiriaceae, Muribaculaceae, Akkermansiaceae, Ruminococcaceae va Prevotellaceae egalladi (4B-rasm). DSS guruhi bilan solishtirganda, BLG ning kamayishi Akkermansiaceae ning ko'pligini oshirdi, ammo Lachnospiraceae va Ruminococcaceae ning ko'pligini kamaytirdi. Shunisi e'tiborga loyiqki, jins darajasida Najas mikrobiotasi Lachnospira_NK4A136_group, Akkermansia va Prevotellaceae_UCG-001 tomonidan band qilingan (4C-rasm). Ushbu topilma shuningdek, BLG bilan davolash DSS chaqiruviga javoban mikrobiota nomutanosibligini samarali ravishda tiklaganligini ko'rsatdi, bu Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas va Oscillibacter ning kamayishi va Akkermansia va Prevotellaceae_UCG-001 ning ko'payishi bilan tavsiflanadi.
4-rasm. BLG DSS keltirib chiqargan kolit sichqonlarida ichak mikrobiotasining ko'pligini o'zgartiradi.(A) Filum darajasida ichak mikrobiotasining ko'pligi; (B) Oila darajasida ichak mikrobiotasining ko'pligi; (C) Jins darajasida ichak mikrobiotasining ko'pligi. Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM (n = 6) sifatida taqdim etilgan.#p < 0.05 yoki ###p < 0.001 va nazorat (Con) guruhi; *p < 0.05 yoki **p < 0.01 yoki ***p < 0.001 va DSS guruhi.
Qisqa zanjirli yog 'kislotalari (SCFA) Akkermansia va Prevotellaceae_UCG-001 ning asosiy metabolitlari ekanligini, asetat, propionat va butirat esa ichak bo'shlig'ida eng ko'p uchraydigan SCFA ekanligini hisobga olsak, 25-27 biz hali ham tadqiqotimizdamiz. 5-rasmda ko'rsatilganidek, DSS bilan davolangan guruhda najasdagi asetat, propionat va butirat konsentratsiyasi sezilarli darajada kamaydi, BLG bilan davolash esa bu kamayishni asosan bostirishi mumkin.
5-rasm. BLG DSS keltirib chiqaradigan kolitli sichqonlarning najasidagi SCFA darajasini oshiradi.(A) Najasdagi sirka kislotasi miqdori; (B) Najasdagi propion kislotasi miqdori; (C) Najasdagi butir kislotasi miqdori. Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM (n = 6) sifatida keltirilgan.#p < 0,05 yoki ##p < 0,01 nazorat (Con) guruhiga nisbatan; *p < 0,05 yoki **p < 0,01 DSS guruhiga nisbatan.
Biz shuningdek, jins darajasidagi differentsial SCFA va najas mikrobiotalari o'rtasidagi Pearson korrelyatsiya koeffitsientini hisobladik. 6-rasmda ko'rsatilganidek, Akkermansia propion kislotasi (Pearson = 0.4866) va yog' kislotasi (Pearson = 0.6192) ishlab chiqarish bilan ijobiy bog'liq edi. Aksincha, Enteromonas va Oscillobacter asetat ishlab chiqarish bilan salbiy bog'liq edi, Pearson koeffitsientlari mos ravishda 0.4709 va 0.5104 ni tashkil etdi. Xuddi shunday, Ruminococcaceae_UCG-014 mos ravishda propion kislotasi (Pearson = 0.4508) va yog' kislotasi (Pearson = 0.5842) ishlab chiqarish bilan salbiy bog'liq edi.
6-rasm. Differentsial SCFA va yo'g'on ichak mikroblari o'rtasidagi Pearson korrelyatsiya tahlili.(A) Sirka kislotasi bilan Enteromonas; (B) Sirka kislotasi bilan miya chayqalishi tayoqchasi; (C) Akkermansiya va propion kislotasi; (D) Propion kislotasi bilan Ruminococcus_UCG-014; (E) Yog' kislotasi bilan Akkermansiya; (F)) Yog' kislotasi bilan Ruminococcus _UCG-014.
Glyukagonga o'xshash peptid-1 (GLP-1) yallig'lanishga qarshi xususiyatlarga ega bo'lgan proglyukagonning (Gcg) hujayra turiga xos post-translatsion mahsulotidir.28 7-rasmda ko'rsatilganidek, DSS Gcg mRNK ekspressiyasining sezilarli darajada pasayishiga olib keldi. Yo'g'on ichak va BLG bilan davolash DSS tomonidan qo'zg'atilgan Gcg kamayishini nazorat guruhiga nisbatan sezilarli darajada qaytarishi mumkin (7A-rasm). Shu bilan birga, DSS bilan davolangan guruhda zardobdagi GLP-1 darajasi sezilarli darajada kamaydi va BLG bilan davolash bu kamayishni sezilarli darajada oldini olishi mumkin edi (7B-rasm). Qisqa zanjirli yog 'kislotalari G-oqsil bilan bog'langan retseptor 43 (GRP43) va G-oqsil bilan bog'langan retseptor 41 (GRP41) faollashuvi orqali GLP-1 sekretsiyasini rag'batlantirishi mumkinligi sababli, biz kolit sichqonlarining yo'g'on ichaklarida GPR41 va GRP43 ni ham tekshirdik va DSS chaqiruvidan keyin GRP43 va GPR41 ning yo'g'on ichak mRNK ekspressiyasi sezilarli darajada kamayganligini va BLG bilan davolash bu pasayishlarni samarali ravishda qutqarishi mumkinligini aniqladik (7A-rasm). 7C va D).
7-rasm. BLG DSS bilan davolangan sichqonlarda zardobdagi GLP-1 darajasini va yo'g'on ichak Gcg, GPR41 va GRP43 mRNA ifodasini oshiradi.(A) Yo'g'on ichak to'qimasida Gcg mRNA ifodasi; (B) Zardobdagi GLP-1 darajasi; (C) Yo'g'on ichak to'qimasida GPR41 mRNA ifodasi; (D) Yo'g'on ichak to'qimasida GPR43 mRNA ifodasi. Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM (n = 5–6) sifatida taqdim etilgan.#p < 0.05 yoki ##p < 0.01 nazorat (Con) guruhiga nisbatan; *p < 0.05 DSS guruhiga nisbatan.
BLG bilan davolash DSS bilan davolangan sichqonlarda sarum GLP-1 darajasini, yo'g'on ichak Gcg mRNA ifodasini va najasdagi SCFA darajasini oshirishi mumkinligi sababli, biz asetat, propionat va butiratni, shuningdek, nazorat guruhi (F-Con), DSS kolit (F-Con) -DSS) va BLG bilan davolangan kolit (F-BLG) sichqonlarida sichqonlarning birlamchi yo'g'on ichak epitelial hujayralaridan GLP-1 ajralib chiqishini tekshirdik. 8A-rasmda ko'rsatilganidek, mos ravishda 2 mM sirka kislotasi, propion kislotasi va butir kislotasi bilan davolangan birlamchi sichqonlarning yo'g'on ichak epitelial hujayralari oldingi tadqiqotlarga mos ravishda GLP-1 ajralib chiqishini sezilarli darajada rag'batlantirdi.29,30 Xuddi shunday, barcha F-Con, F-DSS va F-BLG (0,25 g najasga teng) sichqonlarning birlamchi yo'g'on ichak epitelial hujayralaridan GLP-1 ning ajralib chiqishini sezilarli darajada rag'batlantirdi. Shunisi e'tiborga loyiqki, F-DSS bilan davolangan birlamchi sichqonlarning yo'g'on ichak epitelial hujayralari tomonidan ajralib chiqadigan GLP-1 miqdori F-Con va F-BLG bilan davolangan birlamchi sichqonlarga qaraganda ancha past edi. yo'g'on ichak epiteliy hujayralari. (8B-rasm). Ushbu ma'lumotlar BLG bilan davolash ichakdagi SCFA dan olingan GLP-1 ishlab chiqarishni sezilarli darajada tiklaganligini ko'rsatadi.
8-rasm BLG dan olingan SCFA sichqonchaning birlamchi yo'g'on ichak epiteliy hujayralaridan GLP-1 ning ajralib chiqishini rag'batlantiradi.(A) Sirka kislotasi, propion kislotasi va yog' kislotasi sichqonchaning birlamchi yo'g'on ichak epiteliy hujayralaridan GLP-1 ning ajralib chiqishini rag'batlantirdi; (B) najas ekstraktlari F-Con, F-DSS va F-BLG sichqonchaning birlamchi yo'g'on ichak epiteliy hujayralarini rag'batlantirdi Ajratilgan GLP-1 miqdori. Yo'g'on ichak epiteliy hujayralarining alikvotalari shisha taglikdagi petri idishlariga joylashtirildi va mos ravishda 2 mM sirka kislotasi, propion kislotasi, yog' kislotasi va najas ekstraktlari F-Con, F-DSS va F-BLG (0,25 g najasga teng) bilan ishlov berildi. 37°C da 2 soat, mos ravishda 5% CO2. Sichqonchaning birlamchi yo'g'on ichak epiteliy hujayralaridan ajralib chiqadigan GLP-1 miqdori ELISA yordamida aniqlandi. Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM (n = 3) sifatida taqdim etilgan. #p < 0.05 yoki ##p < 0.01 va blank yoki F-Con; *p < 0.05 va F-DSS.
Qisqartmalar: Ace, sirka kislotasi; Pro, propion kislotasi; ammo, yog' kislotasi; F-Con, nazorat sichqonlaridan olingan najas ekstrakti; F-DSS, kolit sichqonlaridan olingan najas ekstrakti; F-BLG, BLG bilan davolangan yo'g'on ichakdan olingan yallig'lanish sichqonlarining najas ekstraktlari.
Jahon sog'liqni saqlash tashkiloti tomonidan refrakter kasallik sifatida ro'yxatga olingan UC global xavfga aylanib bormoqda; ammo, kasallikni bashorat qilish, oldini olish va davolashning samarali usullari hali ham cheklangan. Shuning uchun, yorilgan ichak yarasi uchun yangi xavfsiz va samarali terapevtik strategiyalarni o'rganish va ishlab chiqish zarurati mavjud. An'anaviy xitoy tibbiyoti preparatlari istiqbolli variant hisoblanadi, chunki asrlar davomida Xitoy aholisida yorilgan ichak yarasini davolashda ko'plab an'anaviy xitoy tibbiyoti preparatlari samarali ekanligi isbotlangan va ularning barchasi asosan odamlar va hayvonlar uchun zararsiz bo'lgan biologik organik va tabiiy materiallardir.31,32 Ushbu tadqiqot yorilgan ichak yarasini davolash uchun xavfsiz va samarali an'anaviy xitoy tibbiyoti preparatini izlashga va uning ta'sir mexanizmini o'rganishga qaratilgan edi.BLG - bu grippni davolashda ishlatiladigan taniqli xitoy o'simlik formulasi.8,33 Bizning laboratoriyamizda va boshqalarda olib borilgan ishlar shuni ko'rsatdiki, BLG bilan bir xil xom ashyodan qayta ishlangan an'anaviy xitoy tibbiyoti mahsuloti bo'lgan indigo odamlar va hayvonlarda yorilgan ichak yarasini davolashda sezilarli samaradorlikka ega.4,34 Biroq, BLG ning kolitga qarshi ta'siri va uning ta'siri Mexanizm noma'lum. Hozirgi tadqiqotda bizning natijalarimiz BLG DSS tomonidan qo'zg'atilgan yo'g'on ichak yallig'lanishini samarali ravishda susaytiradi, bu esa ichakning modulyatsiyasi bilan bog'liq. mikrobiota va ichakdan olingan GLP-1 ishlab chiqarishni tiklash.
Ma'lumki, UC vazn yo'qotish, diareya, rektal qon ketish va yo'g'on ichak shilliq qavatining keng shikastlanishi kabi odatiy klinik xususiyatlarga ega bo'lgan qaytalanuvchi davrlar bilan tavsiflanadi.35 Shunday qilib, surunkali qaytalanuvchi kolit besh kun davomida 1,8% DSS ning uch tsiklini berish, so'ngra yetti kun ichimlik suvi bilan qo'llash orqali qo'llanildi. 1B-rasmda ko'rsatilgandek, o'zgaruvchan vazn yo'qotish va DAI ballari surunkali qaytalanuvchi kolitning muvaffaqiyatli qo'zg'atilishidan dalolat beradi. BLG bilan davolangan guruhdagi sichqonlar 8-kundan boshlab yuqoriga ko'tarilishni ko'rsatdilar, bu 24-kundan sezilarli darajada farq qildi. Xuddi shu o'zgarishlar DAI balida ham kuzatildi, bu kolitning klinik yaxshilanishining yaxshilanishini ko'rsatadi. Yo'g'on ichak shikastlanishi va yallig'lanish holati nuqtai nazaridan, yo'g'on ichak uzunligi, yo'g'on ichak to'qimalarining shikastlanishi va yo'g'on ichak to'qimasida genlarning ifodalanishi va proyallig'lanish sitokinlari TNF-α, IL-1β va IL-6 ning ishlab chiqarilishi ham BLG bilan davolashdan keyin sezilarli darajada yaxshilandi. Umuman olganda, bu natijalar BLG sichqonlarda surunkali qaytalanuvchi kolitni davolashda samarali ekanligini aniq ko'rsatib turibdi.
BLG o'zining farmakologik ta'sirini qanday namoyon qiladi? Oldingi ko'plab tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, ichak mikrobiotasi UC patogenezida muhim rol o'ynaydi va mikrobiomga asoslangan va mikrobiomga yo'naltirilgan terapiya UCni davolash uchun juda jozibador strategiya sifatida paydo bo'ldi. Ushbu tadqiqotda biz BLG bilan davolash ichak mikrobiotasi tarkibida sezilarli o'zgarishlarga olib kelganligini ko'rsatdik, bu BLG ning DSS tomonidan qo'zg'atilgan kolitga qarshi himoya ta'siri ichak mikrobiotasini modulyatsiya qilish bilan bog'liqligini ko'rsatadi. Bu kuzatish ichak mikrobiotasining gomeostazini qayta dasturlash TCM preparatlarining samaradorligini tushunishning muhim yondashuvi degan fikrga mos keladi.36,37 Shunisi e'tiborga loyiqki, Akkermansia - bu ichakning shilliq qavatida yashovchi, musinlarni parchalaydigan, propion kislotasini ishlab chiqaradigan, qadah hujayralari differentsiatsiyasini rag'batlantiradigan va shilliq qavatning to'siq yaxlitligi funktsiyasini saqlaydigan Gram-manfiy va qat'iy anaerob bakteriya.26 Ko'plab klinik va hayvonlar haqidagi ma'lumotlar shuni ko'rsatadiki, Akkermansia sog'lom shilliq qavat bilan yuqori darajada bog'liq,38 va Akkermansia spp. ni og'iz orqali qabul qilish. shilliq qavat yallig'lanishini sezilarli darajada yaxshilashi mumkin.39 Bizning hozirgi ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatadiki, BLG bilan davolashdan keyin Akkermansia ning nisbiy miqdori sezilarli darajada oshadi. Bundan tashqari, Prevotellaceae_UCG-001 SCFA ishlab chiqaruvchi bakteriya hisoblanadi.27 Ko'p tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, Prevotellaceae_UCG-001 kolitli hayvonlarning najasida past nisbiy miqdorda topilgan.40,41 Bizning hozirgi ma'lumotlarimiz shuningdek, BLG bilan davolash DSS bilan davolash qilingan sichqonlarning yo'g'on ichakida Prevotellaceae_UCG-001 ning nisbiy miqdorini sezilarli darajada oshirishi mumkinligini ko'rsatadi. Aksincha, Oscillibacter mezofil, qat'iy anaerob bakteriya hisoblanadi.42 Oscillibacter ning nisbiy miqdori UC sichqonlarida sezilarli darajada oshganligi va IL-6 va IL-1β darajalari va patologik ballar bilan sezilarli darajada ijobiy bog'liqligi haqida xabar berilgan.43,44 Shunisi e'tiborga loyiqki, BLG bilan davolash DSS bilan davolash qilingan sichqonlarning najasida Oscillibacter ning nisbiy miqdorini sezilarli darajada kamaytirdi. Shunisi e'tiborga loyiqki, bu BLG bilan o'zgartirilgan bakteriyalar eng ko'p SCFA ishlab chiqaruvchi bakteriyalar edi. Oldingi ko'plab tadqiqotlar SCFAlarning yo'g'on ichak yallig'lanishiga va ichak epiteliysining yaxlitligini himoya qilishga potentsial foydali ta'sirini ko'rsatdi.45,46 Bizning hozirgi ma'lumotlarimiz shuningdek, BLG bilan davolangan sichqonlarda DSS bilan davolangan najasdagi SCFA asetat, propionat va butirat konsentratsiyasi sezilarli darajada oshganligini ko'rsatdi. Birgalikda, bu topilmalar BLG bilan davolash surunkali qaytalanuvchi kolitli sichqonlarda DSS tomonidan qo'zg'atilgan SCFA ishlab chiqaruvchi bakteriyalarni samarali ravishda kuchaytirishi mumkinligini aniq ko'rsatib turibdi.
GLP-1 asosan yonbosh ichak va yo'g'on ichakda ishlab chiqariladigan inkretin bo'lib, oshqozon bo'shatilishini kechiktirishda va ovqatdan keyin qon glyukozasini pasaytirishda muhim rol o'ynaydi.47 Dalillar shuni ko'rsatadiki, dipeptidil peptidaza (DPP)-4, GLP-1 retseptor agonisti va GLP-1 nanomeditsinasi sichqonlarda ichak yallig'lanishini samarali ravishda engillashtirishi mumkin.48-51 Avvalgi tadqiqotlarda xabar qilinganidek, yuqori SCFA konsentratsiyasi odamlar va sichqonlarda plazma GLP-1 darajasi bilan bog'liq edi. 52 Bizning hozirgi ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatadiki, BLG bilan davolashdan so'ng, sarum GLP-1 darajasi va Gcg mRNA ekspressiyasi sezilarli darajada oshdi. Xuddi shunday, DSS bilan davolash qilingan kolit sichqonlarining najas ekstraktlari bilan stimulyatsiyaga nisbatan BLG bilan davolash qilingan kolit sichqonlarining najas ekstraktlari bilan stimulyatsiyadan so'ng yo'g'on ichak madaniyatlarida GLP-1 sekretsiyasi sezilarli darajada oshdi. SCFAlar GLP-1 ning ajralib chiqishiga qanday ta'sir qiladi? Gwen Tolhurst va boshqalar. SCFA GRP43 va GPR41 orqali GLP-1 sekretsiyasini rag'batlantirishi mumkinligini xabar qildi.29 Bizning hozirgi ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatadiki, BLG bilan davolash DSS bilan davolangan sichqonlarning yo'g'on ichakida GRP43 va GPR41 mRNA ekspressiyasini sezilarli darajada oshiradi. Ushbu ma'lumotlar BLG bilan davolash GRP43 va GPR41 ni faollashtirish orqali SCFA tomonidan qo'llab-quvvatlangan GLP-1 ishlab chiqarishni tiklashi mumkinligini ko'rsatadi.
BLG Xitoyda uzoq muddatli retseptsiz (OTC) dori vositasidir. Kunming sichqonlarida BLG ning maksimal qabul qilinadigan dozasi 80 g/kg ni tashkil qiladi va o'tkir toksiklik kuzatilmagan.53 Hozirgi vaqtda odamlarda tavsiya etilgan BLG dozasi (shakarsiz) kuniga 9-15 g (kuniga 3 marta). Bizning tadqiqotimiz shuni ko'rsatdiki, 1 g/kg dozada BLG sichqonlarda DSS keltirib chiqaradigan surunkali qaytalanuvchi kolitni yaxshilagan. Bu doz klinik jihatdan qo'llaniladigan BLG dozasiga yaqin. Bizning tadqiqotimiz shuningdek, uning ta'sir mexanizmi, hech bo'lmaganda qisman, ichak mikrobiotasidagi o'zgarishlar, xususan, Akkermansia va Prevotellaceae_UCG-001 kabi SCFA ishlab chiqaruvchi bakteriyalar, ichakdan olingan GLP-1 ishlab chiqarishni tiklash orqali vositachilik qilishini aniqladi. Bu topilmalar BLG klinik kolitni davolash uchun potentsial terapevtik vosita sifatida qo'shimcha ko'rib chiqishga loyiq ekanligini ko'rsatadi. Biroq, uning ichak mikrobiotasini modulyatsiya qilishining aniq mexanizmi mikrobiota yetishmaydigan sichqonlar va najasli bakteriyalar transplantatsiyasi bilan tasdiqlanishi kerak.
Ace, sirka kislotasi; ammo, yog' kislotasi; BLG, pandan; DSS, dekstran natriy sulfat; DAI, kasallik faolligi indeksi; DPP, dipeptidil peptidaza; FID, olov ionizatsiyasi detektori; F-Con, nazorat Sichqonlarning najas ekstraktlari; F-DSS, DSS kolit sichqonlarining najas ekstraktlari; F-BLG, BLG bilan davolangan kolit sichqonlarining najas ekstraktlari; GLP-1, glyukagonga o'xshash peptid-1; Gcg, glyukagon; gaz xromatografiyasi, gaz xromatografiyasi; GRP43, G oqsili bilan bog'langan retseptor 43; GRP41, G oqsili bilan bog'langan retseptor 41; H&E, gematoksilin-eozin; HBSS, Hanksning muvozanatli tuz eritmasi; OTC, OTC; PCA, asosiy komponent tahlili; PCoA, asosiy koordinata tahlili; Pro, propion kislotasi; SASP, sulfasalazin; SCFA, qisqa zanjirli yog 'kislotalari; Xitoy tibbiyoti, an'anaviy xitoy tibbiyoti; Yarali kolit, ülseratif kolit.
Barcha eksperimental protokollar Pekin universiteti Shenzhen-Gonkong Fan va Texnologiya Universiteti Tibbiyot Markazining (Shenzhen, Xitoy) Hayvonlar etikasi qo'mitasi tomonidan Institutsional ko'rsatmalar va Hayvonlar qoidalariga (etika raqami A2020157) muvofiq tasdiqlangan.
Barcha mualliflar konsepsiya va dizayn, ma'lumotlarni to'plash yoki ma'lumotlarni tahlil qilish va talqin qilishga katta hissa qo'shdilar; maqolani tayyorlashda yoki muhim intellektual kontentni tanqidiy qayta ko'rib chiqishda ishtirok etdilar; qo'lyozmani joriy jurnalga taqdim etishga rozi bo'lishdi; nihoyat nashr uchun versiyasini tasdiqladilar; Ishning barcha jihatlari uchun javobgardirlar.
Ushbu ish Xitoy Milliy Tabiiy Fanlar Jamg'armasi (81560676 va 81660479), Shenzhen universitetining birinchi darajali loyihasi (86000000210), Shenzhen Fan va Texnologiya Innovatsiyalari Qo'mitasi Jamg'armasi (JCYJ20210324093810026) va Guangdong provinsiyasi Tibbiyot fanlari va texnologiyalari tadqiqotlari jamg'armasi (A2020157 va A2020272), Guizhou tibbiyot universiteti dorixonasi Guizhou provinsiyasi tomonidan moliyalashtiriladigan Kalit Laboratoriya (YWZJ2020-01) va Pekin universiteti Shenzhen kasalxonasi (JCYJ2018009) tomonidan qo'llab-quvvatlandi.
1. Tang B, Zhu J, Zhang B va boshqalar. Sichqonlarda dekstran natriy sulfat keltirib chiqaradigan eksperimental kolitda triptolidning yallig'lanishga qarshi vosita sifatida terapevtik potentsiali. pre-immune.2020;11:592084.doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
2. Kaplan GG. IBDning global yuki: 2015 yildan 2025 yilgacha. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2015; 12: 720–727. doi: 10.1038/nrgastro. 2015.150
3. Peng J, Zheng TT, Li Xue va boshqalar. O'simliklardan olingan alkaloidlar: yallig'lanishli ichak kasalliklarida istiqbolli kasallik modifikatorlari. Prefarmakologiya. 2019; 10: 351. doi: 10.3389/fphar. 2019.00351
4. Xiao Haiteng, Peng Jie, Wen B va boshqalar. Indigo Naturalis sichqonlarda DSS keltirib chiqaradigan kolitda yo'g'on ichakning oksidlovchi stressini va Th1/Th17 reaksiyalarini inhibe qiladi. Oxid Med Cell Longev.2019;2019:9480945.doi: 10.1155/2019/9480945
5. Chen M, Ding Y, Tong Z. Yarali kolitni davolashda Sophora flavescens (Sophora flavescens) xitoy o'simlik dorilarining samaradorligi va xavfsizligi: klinik dalillar va potentsial mexanizmlar. Prefarmakologiya. 2020; 11:603476.doi:10.3389/fphar.2020.603476
6. Cao Fang, Liu Jie, Sha Benxing, Pan HF. Tabiiy mahsulotlar: yallig'lanishli ichak kasalliklarini davolash uchun eksperimental jihatdan samarali dorilar. Curr Pharmaceuticals. 2019; 25: 4893–4913. doi: 10.2174/1381612825666191216154224
7. Zhang C, Jiang M, Lu A. Yarali kolitni an'anaviy xitoy tibbiyoti bilan yordamchi davolash haqida mulohazalar. Clinical Rev Allergy Immunization. 2013;44:274–283.doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
8. Li Zhongteng, Li Li, Chen TT va boshqalar. Mavsumiy grippni davolashda Banlangen granulalarining samaradorligi va xavfsizligi: randomizatsiyalangan nazorat ostidagi sinov uchun tadqiqot protokoli.trial.2015;16:126.doi: 10.1186/s13063-015-0645-x